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分光光度計(jì)的校驗(yàn)是確保其準(zhǔn)確性和可靠性的重要步驟

發(fā)表時間:2023-09-25      點(diǎn)擊次數(shù):8434

  分光光度計(jì)是一種常用的光學(xué)儀器,它采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源。光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。通過使用分光光度計(jì),我們可以得到樣品的光譜信息,了解其吸收或透射特性,從而進(jìn)行定性和定量分析。


  分光光度計(jì)的校驗(yàn)是確保其準(zhǔn)確性和可靠性的重要步驟。以下是一些常見的分光光度計(jì)校驗(yàn)方法:

  1、波長準(zhǔn)確度的檢驗(yàn):

  分光光度計(jì)在使用過程中,由于機(jī)械振動、溫度變化、燈絲變形、燈座松動或更換燈泡等原因,經(jīng)常會出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實(shí)際通過溶液的波長不符合的現(xiàn)象,因而導(dǎo)致儀器靈明度降低,影響測定結(jié)果的精度,需要進(jìn)行檢驗(yàn)。

  使用標(biāo)準(zhǔn)溶液,測量其在不同波長下的吸光度,并與已知波長下的吸光度進(jìn)行比較。如果存在差異,則需要調(diào)整儀器的波長設(shè)置,使其與真實(shí)的波長相匹配。

  2、零點(diǎn)校準(zhǔn):

  將沒有樣品的純?nèi)軇┗蚩瞻兹芤悍湃霕悠烦刂?,調(diào)節(jié)儀器的零點(diǎn)位置,使其讀數(shù)為零。這可以消除系統(tǒng)漂移或背景噪音對測量結(jié)果的影響。

  3、穩(wěn)定度的檢驗(yàn):

  在零點(diǎn)不受光的條件下,用零點(diǎn)調(diào)節(jié)器將儀器調(diào)至零點(diǎn),觀察3分鐘讀取透射比的變化,即為零點(diǎn)穩(wěn)定性。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處,調(diào)節(jié)零點(diǎn)后,蓋上樣品室蓋(打開光門),使光電管受光,調(diào)節(jié)透射比為95%(數(shù)顯儀器調(diào)至100%)察3分鐘讀取透射比的變化,為光電流穩(wěn)定性。

  4、光的檢驗(yàn):

  可見分光計(jì)棱鏡式儀器在420nm處,光柵式儀器在360nm處,紫外分光計(jì)在220nm處分別用符合規(guī)定的截止濾光片,以空氣為參比,測量其透射比值,即為儀器在相應(yīng)波長下的雜散輻射率。

  5、透射比正確度的檢驗(yàn):

  用透射比標(biāo)準(zhǔn)值分別為10%、20%、30%左右的光譜中性濾光片,可見光區(qū)分別在440、546、635nm波長處,以空氣為參比,分別測量各濾光片的透射比,紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長處,以高氯酸溶液為參比,測量其透射比。

  6、線性校準(zhǔn):

  使用標(biāo)準(zhǔn)溶液或標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行線性校準(zhǔn)。通過測量不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣品,繪制吸光度與濃度之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)該曲線進(jìn)行樣品的定量分析,并驗(yàn)證儀器的線性范圍和靈敏度。

分光光度計(jì)4.png

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